IPTG CAS:367-93-1 Өндіруші бағасы
Изопропил β-D-1-тиогалактопиранозид (IPTG) лактозаның синтетикалық аналогы болып табылады, ол молекулалық биология зерттеулерінде және биотехнологияда кеңінен қолданылады.IPTG ең алдымен бактериалды жүйелерде гендердің экспрессиясын индукциялау үшін қолданылады, мұнда ол мақсатты гендердің транскрипциясын бастау үшін молекулалық триггер ретінде қызмет етеді.
Өсу ортасына қосылғанда, IPTG бактериялармен қабылданады және лак-репрессорлық протеинмен байланысып, оның лак оперонының белсенділігін блоктауға жол бермейді.Лак оперон - бұл лактозаның алмасуына қатысатын гендердің кластері және репрессорлық ақуыз жойылған кезде гендер экспрессияланады.
IPTG көбінесе lacUV5 мутантты промоторымен бірге қолданылады, ол лак промоутерінің конститутивтік белсенді нұсқасы болып табылады.IPTG индукциясын осы мутантты промотормен біріктіру арқылы зерттеушілер ген экспрессиясының жоғары деңгейіне қол жеткізе алады.Бұл тазарту немесе басқа төменгі ағынды қолдану үшін ақуыздың көп мөлшерін өндіруге мүмкіндік береді.
Гендік экспрессиядан басқа, IPTG ақ/көк скринингтік талдауларда жиі қолданылады.Бұл әдістемеде lacZ гені әдетте қызығушылық тудыратын генге біріктіріледі және осы синтез генін сәтті экспрессиялайтын бактериялар белсенді β-галактозидаза ферментін шығарады.IPTG X-gal сияқты хромогенді субстратпен бірге қосылғанда, синтез генін экспрессиялайтын бактериялар β-галактозидазаның белсенділігіне байланысты көк түске боялады.Бұл қызығушылық генін сәтті біріктірген рекомбинантты штаммдарды анықтауға және таңдауға мүмкіндік береді.
Ген экспрессиясының индукциясы: IPTG әдетте бактериялық жүйелерде мақсатты гендердің экспрессиясын индукциялау үшін қолданылады.Ол табиғи индуктор лактозаны еліктейді және лак-репрессор протеинімен байланысады, бұл оның лак оперонына тосқауыл қоюға жол бермейді.Бұл қажетті гендердің транскрипциясы мен экспрессиясына мүмкіндік береді.
Протеинді экспрессиялау және тазарту: IPTG индукциясы көбінесе биохимиялық зерттеулер, терапевтік өндіріс немесе құрылымдық талдау сияқты әртүрлі мақсаттарға арналған рекомбинантты ақуыздардың көп мөлшерін өндіру үшін қолданылады.Сәйкес экспрессиялық векторларды және IPTG индукциясын пайдалану арқылы зерттеушілер бактериялық иелерінде мақсатты ақуыз өндірісінің жоғары деңгейіне қол жеткізе алады.
Көк/ақ скрининг: IPTG көк/ақ скринингтік талдаулар үшін lacZ генімен және X-gal сияқты хромогенді субстратпен бірге жиі пайдаланылады.lacZ гені әдетте қызығушылық генімен біріктіріледі және осы синтез генін сәтті экспрессиялайтын бактериялар белсенді β-галактозидаза ферментін шығарады.IPTG және хромогенді субстрат қосылғанда, синтез генін білдіретін рекомбинантты штаммдар көк түске боялып, оңай сәйкестендіруге және таңдауға мүмкіндік береді.
Гендердің реттелуін зерттеу: IPTG индукциясы әдетте гендер мен оперондардың, әсіресе лак оперондарының реттелуін зерттеу үшін зерттеулерде қолданылады.IPTG концентрациясын манипуляциялау және лак оперон компоненттерінің экспрессиясын бақылау арқылы зерттеушілер гендік реттеу механизмдерін және әртүрлі факторлардың немесе мутациялардың рөлін зерттей алады.
Гендерді экспрессиялау жүйелері: IPTG бірнеше гендік экспрессия жүйелерінің маңызды құрамдас бөлігі болып табылады, мысалы, T7 промоторларына негізделген жүйелер.Бұл жүйелерде лак промоторы көбінесе T7 РНҚ полимеразасының экспрессиясын жүргізу үшін қолданылады, ол өз кезегінде T7 промоторларының тізбегінің бақылауымен мақсатты гендерді транскрипциялайды.IPTG мақсатты ген экспрессиясының белсендірілуіне әкелетін T7 РНҚ-полимераза экспрессиясын индукциялау үшін қолданылады.
| Құрамы | C9H18O5S |
| Талдау | 99% |
| Сыртқы түрі | Ақ ұнтақ |
| CAS № | 367-93-1 |
| Қаптама | Шағын және көлемді |
| Жарамдылық мерзімі | 2 жыл |
| Сақтау | Салқын және құрғақ жерде сақтаңыз |
| Сертификаттау | ISO. |
