4-нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS: 200422-18-0

Әсері: ONPG - β-галактозидаза ферментінің болуы мен белсенділігін анықтау үшін арнайы қолданылатын субстрат.β-галактозидаза ферменті болған және белсенді болған кезде ол ONPG-ны екі өнімге бөледі: о-нитрофенол және галактоза туындысы.О-нитрофенолдың бөлінуі сары түстің өзгеруіне әкеледі, оны спектрофотометр көмегімен өлшеуге болады.

Қолданылуы: ONPG молекулалық биология және биохимия зерттеулерінде бірнеше қолданбаларға ие:

β-галактозидаза белсенділігін анықтау: ONPG әдетте β-галактозидаза ферментінің белсенділігін өлшеу және сандық бағалау үшін қолданылады.Фермент белсенділігіне тура пропорционал о-нитрофенол түзілу жылдамдығын спектрофотометриялық әдіспен өлшеуге болады.

Геннің экспрессиясы және реттелуі: ONPG жиі ген экспрессиясы мен реттеуді зерттеуге қатысты эксперименттерде қолданылады.Ол арнайы промоторлардың бақылауындағы гендердің экспрессиясын зерттеу үшін жиі қолданылатын lacZ синтез жүйесі сияқты синтездік ақуызды талдауда жиі қолданылады.ONPG көмегімен өлшенген бета-галактозидаза белсенділігі ген экспрессиясының деңгейі туралы түсінік береді.

β-галактозидаза белсенділігінің скринингі: ONPG β-галактозидазаны кодтайтын LacZ генінің болуын және функционалдығын анықтау үшін рекомбинантты ДНҚ технологиясында колориметриялық скрининг әдісі ретінде пайдаланылуы мүмкін.Бұл скрининг әдісі қызығушылық гені бар клондарды анықтауға көмектеседі.

Ферменттердің кинетикасын зерттеу: ONPG β-галактозидаза ферментінің кинетикасын зерттеуде де пайдалы.Әртүрлі субстрат концентрациясында фермент-субстрат реакциясының жылдамдығын өлшеу арқылы Михаэлис-Ментен тұрақтылары (Км) және максималды реакция жылдамдығы (Vmax) сияқты кинетикалық параметрлерді анықтауға болады.