Фенилгалактозид CAS:2818-58-8

Фермент белсенділігіне әсері: Фенилгалактозид β-галактозидаза ферментінің белсенділігін өлшеу үшін жиі қолданылады. Фенилгалактозид β-галактозидазамен гидролизденгенде, ол р-нитрофенол бөліп шығарады. р-нитрофенолдың жиналуын сандық түрде өлшеуге болады, бұл β-галактозидазаның белсенділігі туралы түсінік береді. Бұл әсер ферменттік талдаулар және скрининг жүйелері сияқты қолданбаларда қолданылады.

Ген экспрессиясын талдау: Фенилгалактозид көбінесе ген экспрессиясын зерттеу үшін молекулалық биология тәжірибелерінде субстрат ретінде қолданылады. β-галактозидазаны кодтайтын lacZ гені әдетте басқа қызығушылық тудыратын гендердің реттеуші тізбектерімен біріктіріледі. lacZ генінің экспрессиясы және фенилгалактозидтің β-галактозидазамен гидролизденуі зерттелетін нысана генінің экспрессия үлгісі мен деңгейін көрсете алады.

Скрининг жүйелері: Фенилгалактозид β-галактозидаза белсенділігін пайдаланатын скрининг жүйелерінің маңызды құрамдас бөлігі болып табылады. Кеңінен танымал мысалдардың бірі - молекулалық биология тәжірибелерінде рекомбинантты немесе трансформацияланған жасушаларды анықтау үшін қолданылатын көк-ақ скрининг әдісі. Рекомбинантты ДНҚ-ны сәтті қабылдаған немесе генетикалық рекомбинациядан өткен колониялар β-галактозидазаны экспрессиялайды, бұл фенилгалактозидтің гидролизіне және көк түстің пайда болуына әкеледі.

Ақуызды тазарту: Кейбір жағдайларда фенилгалактозидті β-галактозидазамен арнайы байланысатын немесе оның көмегімен белсендірілетін ақуыздарды тазарту үшін аффиндік хроматография үшін лиганд ретінде пайдалануға болады. Қызығушылық тудыратын ақуызда аффиндік белгі немесе β-галактозидазамен байланысатын домені бар біріктіру тегі болуы мүмкін. Ақуыз қоспасын иммобилизацияланған фенилгалактозиді бар баған арқылы өткізу арқылы қажетті ақуызды таңдамалы түрде ұстап, кейіннен элюциялауға болады.